微源檢測提供高效液相色譜檢測氨基酸：纈氨酸的方法驗證

氨基酸是生物功能大分子蛋白質的基本組成單位，能夠在植物或動物組織中合成，可由蛋白質水解得到，我們都知道氨基酸可從食物中獲取，無須透過其他輔助手段補充，但在特殊情況下，為了恢復體內的代謝平衡，我們就需要額外的補充各種氨基酸。

纈氨酸是人體八種必需氨基酸之一，屬於支鏈氨基酸，具有多種生理功能，被廣泛用於醫藥、食品等多個領域，其作用包括但不限於修復組織，調節血糖，提供需要的能量，為肌肉需要的額外能量產生葡萄糖等。目前纈氨酸是氨基酸原料藥中用量較大的品種之一，實驗室查閱資料結合經驗給大家分享一種利用高效液相色譜的方法檢測發酵液中的纈氨酸含量。

發酵是一種常用的纈氨酸的製備方法，具有原料成本低，反應條件溫和可大規模生產等優點，但是在發酵過程中，如果加入的原料糖不能全部被利用，就會讓發酵液中還夾帶多糖、等不能被髮酵利用的物質，因此發酵結束後，除纈氨酸外，還有蛋白質、色素、原料還原糖、多糖、非還原糖等雜質存在。

色譜條件流動相為甲醇-NaH2PO4（40：60），流速1。0 mL／min，紫外檢測波長210nm；進樣量為20μL。溫度恆溫40℃。精密稱取0。5000g標樣（精確至0。0001g），加少量超純水用超聲波振盪使其溶解，然後用超純水定容至100mL容量瓶中，用移液管移取5mL置另一容量瓶並用超純水定容至100mL，再依此法移5mL至另一容量瓶用稀釋液定容至100mL。此溶液作為標準溶液，經0。45μm濾膜過濾，進行HPLC分析配製成標準溶液。

準確稱取0。5000g樣品（精確至0。0001 g），按上述方法稀釋，測定時經0。45μm濾膜過濾，進行HPLC分析取不同的樣品，按實驗方法進行測定，標品分別進5μL、10μL、15μL、 20μL、25μL，記錄色譜峰面積，以峰面積y為縱坐 標，以質量濃度x為橫座標，得到線性方程和相關係數。

方法利用高效液相色譜法，最佳化色譜條件，用磷酸鹽緩衝溶液體系測定，得到曲線的相關係數r>0。9998，精密度良好，實驗過程簡便易操作，檢測的結果令人滿意。實驗室專注為產品生產過程中可能產生的雜質提供評估報告、方法開發、驗證及樣品檢測等一系列完整的解決方案。更多檢測問題歡迎私信及評論區留言！

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