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IPTG溶液(50mgmL)

2022-07-09由 尚寶生物 發表于 漁業

氨苄青黴素怎麼溶解

IPTG溶液(50mg/mL)

產品貨號:

R21980

產品規格:

5ml

產品簡介:

IPTG

為安慰性誘導物,

X-gal

為生色底物,二者共同用於藍白斑篩選。

IPTG

可誘導載體

Lac

操縱子

DNA

區段合成

β-

半乳糖苷酶氨基端片段,該片段可與宿主細胞編碼的缺陷型

β-

半乳糖苷酶實現基因內互補

(α

互補

。實現

α

互補的細菌鋪在含有

X-gal

生色底物的培養基上,可形成藍色菌落。外源

DNA

插入質粒的多克隆位點後可破壞

α

互補作用,將產生白色菌落。

IPTG

也是常用的基因工程中重組蛋白表達的誘導劑。

此產品為

IPTG

用雙蒸水溶解過濾後配成的無菌溶液。

使用說明:

蛋白表達誘導:

50mg/mL

濃度為

210mM

。如果終濃度要求為

0。5mM

,則每升培養基中加入

2。38mL IPTG

溶液(

50mg/mL

)。如果實驗中需要使用其他誘導濃度,可自行計算加入量。

藍白斑篩選:

(1)

100mL

的瓊脂培養基中,加入

500μL

X-gal

溶液(

20mg/mL

)、

250μL

IPTG

溶液(

50mg/mL

)和

100 μL

Amp

(氨苄青黴素,

100 mg/mL

),製作成含

X-Gal

IPTG

Amp

平板培養基。高壓滅菌後的培養基需冷卻至

55℃

以下時加入

X-Gal

IPTG

Amp

,以防失活。

(2)

實際上

X-gal

IPTG

可以直接塗抹在平板培養基表面,

90mm

的平板,

X-gal

20mg/mL

)塗

40μL

IPTG

50mg/mL

)塗

16μL

150mm

的平板加倍使用量,待塗布的液體幹後就可以使用。細菌鋪板後,

37℃

培養過夜,可根據長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組體(白色菌落為具有

DNA

插入片段的基因重組體)。

注意事項:

1。

為了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作

儲存條件:

-20℃

避光儲存儲存,有效期至少

12

個月。

IPTG溶液(50mgmL)

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