IPTG溶液(50mgmL)
2022-07-09由 尚寶生物 發表于 漁業
氨苄青黴素怎麼溶解
IPTG溶液(50mg/mL)
產品貨號:
R21980
產品規格:
5ml
產品簡介:
IPTG
為安慰性誘導物,
X-gal
為生色底物,二者共同用於藍白斑篩選。
IPTG
可誘導載體
Lac
操縱子
DNA
區段合成
β-
半乳糖苷酶氨基端片段,該片段可與宿主細胞編碼的缺陷型
β-
半乳糖苷酶實現基因內互補
(α
互補
)
。實現
α
互補的細菌鋪在含有
X-gal
生色底物的培養基上,可形成藍色菌落。外源
DNA
插入質粒的多克隆位點後可破壞
α
互補作用,將產生白色菌落。
IPTG
也是常用的基因工程中重組蛋白表達的誘導劑。
此產品為
IPTG
用雙蒸水溶解過濾後配成的無菌溶液。
使用說明:
蛋白表達誘導:
50mg/mL
濃度為
210mM
。如果終濃度要求為
0。5mM
,則每升培養基中加入
2。38mL IPTG
溶液(
50mg/mL
)。如果實驗中需要使用其他誘導濃度,可自行計算加入量。
藍白斑篩選:
(1)
在
100mL
的瓊脂培養基中,加入
500μL
的
X-gal
溶液(
20mg/mL
)、
250μL
的
IPTG
溶液(
50mg/mL
)和
100 μL
的
Amp
(氨苄青黴素,
100 mg/mL
),製作成含
X-Gal
、
IPTG
和
Amp
平板培養基。高壓滅菌後的培養基需冷卻至
55℃
以下時加入
X-Gal
、
IPTG
和
Amp
,以防失活。
(2)
實際上
X-gal
和
IPTG
可以直接塗抹在平板培養基表面,
90mm
的平板,
X-gal
(
20mg/mL
)塗
40μL
,
IPTG
(
50mg/mL
)塗
16μL
。
150mm
的平板加倍使用量,待塗布的液體幹後就可以使用。細菌鋪板後,
37℃
培養過夜,可根據長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組體(白色菌落為具有
DNA
插入片段的基因重組體)。
注意事項:
1。
為了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作
。
儲存條件:
-20℃
避光儲存儲存,有效期至少
12
個月。
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