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emb培養基是什麼培養基

2023-01-04由 帆帆七聊教育 發表于 漁業

血清磷的正常值範圍是多少

EMB培養基屬於鑑別性培養基,鑑別大腸桿菌(作產酸指示劑),比較常用。

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EMB瓊脂培養基 EMB(Eosin Methylene Blue)agar伊紅美藍瓊脂培養基的簡稱。是為了觀察某種糖被分解後是否產生酸的一種培養基。此培養基含有酩蛋白樣的氨基酸混合物、酵母浸液、適量的無機鹽、0。04%的伊紅Y、0。0065%的美藍和供作試驗的糖。常用於食品、乳製品、水源和病源標本中的革蘭氏陰性腸道菌的分離和鑑別。

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EMB培養基含有伊紅和美藍兩種染料作為指示劑。蛋白腖提供細菌生長髮育所需的氮源、維生素和氨基酸,乳糖提供發酵所需的碳源,磷酸氫二鉀維持緩衝體系,伊紅 Y 和美藍抑制絕大部分革蘭氏陽性菌的生長。瓊脂是凝固劑。大腸桿菌可發酵乳糖產酸造成酸性環境時,這兩種染料結合形成複合物,使大腸桿菌菌落帶金屬光澤的深綠色,而與其他不能發酵乳糖產酸的微生物區分開。沙門氏菌形成無色菌落。金黃色葡萄球菌(革蘭陽性菌)基本上不生長。

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培養基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配製而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。培養基種類很多,根據配製原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基;根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體培養基;根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑑別培養基等;根據使用範圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、真菌培養基等。培養基配成後一般需測試並調節pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養基由於富含營養物質,易被汙染或變質。配好後不宜久置,最好現配現用。

培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配製的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、鹼基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。

培養基由於配製的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮後,易被細菌汙染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處儲存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由於液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。

培養基的配製:

1。配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥後立即蓋上瓶蓋)。

2。溶解:澱粉溶解:少量冷水調成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

3。調PH:用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養基調節到所要求的值。

4。過濾:濾紙或棉花進行過濾。(有時可以省去)

5。分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

6。包紮:分裝好後,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄溼。

7。滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。

8。擺斜面:滅菌後需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約佔試管長度的1/2。

9。貯存:培養基在30℃下放置一天,無汙染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放於2-8℃冰箱中備用。

天然培養基:天然培養基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物製成的培養基。例如。牛肉膏蛋白腖培養基、麥芽汁培養基和LB培養基等。常用的天然有機營養物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養基成本較低,除在實驗室經常使用外,也適於用來進行工業上大規模的微生物發酵生產。

EMB培養基:

常用於鑑別E。coli,蛋白腖10g,乳糖5g,蔗糖5g,磷酸氫二鉀2g,伊紅Y0。4g,美藍0。065g,蒸餾水1000g,pH7。2

2216E培養基配方,分離海洋微生物的培養基配方,蛋白腖5g,酵母膏1g,磷酸高鐵0。01g,瓊脂15-20g,陳海水1000ml,煮沸氫氧化鈉(5%)的溶液調pH值7。6-7。8

伊紅美藍培養基,可用於檢測水中大腸桿菌的含量首先按以下組成配製基礎培養基。蛋白腖10g,NaCl5g瓊脂15-20g

將上述物質溶解後,用蒸餾水定容至1000mL,調節pH為7。6。滅菌後,冷卻至60℃左右,再按下面的比例,在無菌操作條件下加入滅菌的乳糖溶液、伊紅水溶液以及美藍水溶液。搖勻後,立即倒平板。溶液中的乳糖在高溫下會破壞,因此一般使用壓力為70kPa、溫度為115℃的條件滅菌20分鐘。基礎培養基100mL,20%乳糖溶液2mL2%伊紅水溶液2mL,0。5%美藍水溶液1mL