遺傳所開發出高精準胞嘧啶鹼基編輯工具
該工作結合基於結構資訊的蛋白理性設計、植物個體全基因組脫靶檢測技術和高通量R-loop脫靶檢測技術,進一步提高了單鹼基編輯的精確性,開發出的兩種能保持高編輯效率且無隨機脫靶效應的CBE變體,為基因治療和植物分子設計育種提供了強有力的工具支撐
不僅是DNA,基因編輯脫靶還會造成RNA突變!好在上海科學家讓單鹼基編輯器升級了
”這一次,科研人員不僅發現問題,也帶來了解決方案:透過點突變的方式對三種單鹼基編輯工具進行突變最佳化,使其完全消除RNA脫靶的活性,首次獲得“升級版”的高精度單鹼基編輯工具,為其進入臨床治療提供了重要基礎
CRISPR-Cas9基因編輯系統脫靶的結構基礎
本研究中的結構資訊指出,REC3點突變會干擾gRNA-TS雜合雙鏈末端扭曲式構象的形成,這導致相關Cas9突變體的脫靶效應和切割速率同時降低
CBE單鹼基編輯器的Cas9非依賴型DNA脫靶風險評估及最佳化
總體而言如若CBE系統中的胞苷脫氨基酶可誘發大腸桿菌中rpoB基因上的C-T突變,會導致大腸桿菌耐受利福平,之後根據耐藥克隆的比例便可評估其Cas9非依賴型DNA脫靶風險研究者透過細菌中的利福平耐藥和胸苷激酶基因突變實驗以及人源細胞系中的R