如何打造無菌室？無菌實驗室裝修設計細節及日常運維

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在微生物工作中，菌種的接種移植是一項主要操作，這項操作的特點就是要保證菌種純種，防止雜菌的汙染。在一般環境的空氣中，由於存在許多塵埃和雜菌，很易造成汙染，對接種工作干擾很大。而無菌室的存在對於菌種的保護起到了很好的作用，減少了汙染情況，所以無菌室也稱接種室，是系統接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。

一、無菌實驗室的裝修設計細節

根據經濟和科學的角度來講，無菌實驗室裝修的基本要求如下：

（1）門應設在離工作臺最遠的位置上，內間應當設拉門，以減少空氣的波動；外間的門最好也用拉門，要設在距內間最遠的位置上。

（2）無菌實驗室設計應有內、外兩間，內間是無菌室，外間是緩衝室。房間容積不宜過大，以便於空氣滅菌。內間面積2×2。5＝5m2，外間面積1×2＝2m2，

高以2。5m以下為宜，都應有天花板。

（3）無菌實驗室容積小而嚴密，使用一段時間後，室內溫度很高，故應設定通氣窗。通氣窗應設在內室進門處的頂棚上（即離工作臺最遠的位置），最好為雙層結構，外層為百葉窗，內層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內飾使用後、滅菌前開啟，以流通空氣。有條件可安裝恆溫恆溼機。

（4）在分隔內間與外間的牆壁或“隔扇”上，應開一個小窗，作接種過程中必要的內外傳遞物品的通道，以減少人員進出內間的次數，降低汙染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內外都掛對拉的窗扇。

二、無菌實驗室的實驗操作注意事項

1．實驗進行前，無菌室及無菌操作檯以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面，並開啟無菌操作檯風扇運轉10分鐘後，才開始實驗操作。

2．小心取用無菌之實驗物品，避免造成汙染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在開啟之容器正上方操作實驗。容器開啟後，以手夾住瓶蓋並握住瓶身，傾斜約45°角取用，儘量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

3．工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套後才進行實驗。對於來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作，並選擇適當等級之無菌操作檯（至少ClassII）。操作過程中，應避免引起氣溶膠類物質的產生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，並避免尖銳針頭之傷害等。

4．接種針每次使用前後，必須透過火焰灼燒滅菌，待冷卻後，方可接種培養物。

5．無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利於氣流之流通。實驗用品以70%的酒精擦拭後才帶入無菌操作檯內。實驗操作應在抬面之中央無菌區域，勿在邊緣的非無菌區域操作。

6．使用無菌瓶內的溶液是，不可將無菌敷料堵塞瓶口傾倒無菌溶液，或直接伸入溶液瓶內蘸取，以免汙染剩餘的溶液。

7．每次操作過程中，均應做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。

8．如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被汙染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液汙染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌後洗滌。

9．無菌包內物品不慎汙染或無菌包浸溼，外界微生物可滲入包內，造成汙染，需重新消毒。

10．凡帶有活菌的物品，必須經消毒後，才能在水龍頭下衝洗，嚴禁汙染下水道。

11．吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

12．帶有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24小時後取出沖洗。

13．戴手套時應注意未戴手套的手不可觸及手套外面，而戴手套的手則不可觸及未戴手套的手或另一手套的裡面。戴手套後如發現破裂，應立即更換。脫手套時，須將手套口翻轉膠下，不可用力強拉手套邊緣或手指部分，以免損壞。

14．實驗完畢後，將實驗物品帶出工作臺，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作檯運轉10分鐘以上後。