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Elabscience_線粒體呼吸鏈複合體檢測的意義及應用

2023-01-08由 Elabscience 發表于 漁業

亞顯微結構是什麼

線粒體作為細胞的能量工廠,其主要功能所涉及的呼吸鏈(Respiratory Chain),是由一系列遞氫反應和遞電子反應按照一定順序排列所組成的連續反應體系,又被稱為電子傳遞鏈。呼吸鏈反應在將代謝物脫下的氫原子生成水的同時,合成大量ATP分子,為機體各類代謝提供所需能量

呼吸鏈反應由鑲嵌在真核生物細胞線粒體內膜上的5個蛋白複合物分步完成。

Elabscience_線粒體呼吸鏈複合體檢測的意義及應用

圖1 線粒體呼吸鏈組成與電子傳遞

Elabscience_線粒體呼吸鏈複合體檢測的意義及應用

其中,複合物I、III、IV既作為電子載體,又是遞氫體,在傳遞電子的同時,將質子(氫離子)由線粒體基質側穿過線粒體內膜,運送至線粒體膜間隙,以建立電化學梯度,這些質子最終透過複合物V作用生成ATP。

針對各複合物的抑制劑可以阻斷呼吸鏈中的電子傳遞過程,引起機體的迅速死亡,是魚藤酮、抗黴素A、氰化物、疊氮化物等物質毒性的主要機理。

應用

線粒體呼吸鏈複合物的缺陷與多種線粒體病有關,包括帕金森病、亨廷頓病、肥厚性心肌病等等。目前在臨床上以營養支援對複合體缺陷或酶活異常進行治療,以減輕症狀或控制病情發展,但沒有特異性的治療方案和對發病機制的有效解釋。相關疾病通常採用線粒體基因組分析與線粒體呼吸鏈酶活性檢測的方式加以確診。

複合物的活性檢測可用於推斷酶複合物之間,以及參與氧化磷酸化的氧化還原過程中電子傳遞的效率,

線粒體複合物的檢測廣泛用於疾病機理研究,藥物開發與作用機制及細胞死亡研究。

研究表明

多種呼吸鏈抑制劑均能抑制半胱氨酸飢餓或Erastin誘導的鐵死亡。在最新命名的銅死亡研究中,發現依賴線粒體呼吸的細胞對銅死亡更敏感;抑制線粒體呼吸鏈複合物I和II可以抑制銅死亡;線粒體解偶聯劑對銅死亡敏感性沒有影響。

對此,Elabscience

®

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檢測原理

根據複合物催化的反應的特點選擇合適的檢測原理,保證測定結果的準確度。如線粒體呼吸鏈複合物I的檢測原理如下:

線粒體呼吸鏈複合物I催化NADH與泛醌底物反應,生成NAD

+

與還原型泛醌,檢測340 nm處NADH吸光度下降速率可反應其活力,特異性抑制劑魚藤酮可抑制該酶,總酶活減去抑制劑抑制後的酶活可反映其特異性酶活。

產品特點

1

酶標板中反應檢測,操作簡便、快速

02

試劑盒自帶抑制劑,特異性高,結果準確

03

提供真實可靠的樣本驗證結果和供樣本稀釋倍數

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