Worthington肽合成應用丨胰凝乳蛋白酶方案

胰凝乳蛋白酶背景：

胰凝乳蛋白酶是一種由胰腺腺泡細胞產生的絲氨酸內肽酶。在胰蛋白酶對糜蛋白酶原進行蛋白水解後，糜蛋白酶被啟用。當胰蛋白酶在賴氨酸和精氨酸處水解時，胰凝乳蛋白酶選擇性地切割由芳香殘基（酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸）形成的肽鍵（Hedstrom等， 1992）。兩種主要形式的胰凝乳蛋白酶 A 和 B 在牛胰腺中的含量相等。它們是非常相似的蛋白質（80% 相同），但具有顯著不同的蛋白水解特性（Hartley 1964、Meloun等人1966、 Smillie 等人1968 和 Graf等人2004）。以下資訊主要與 A 型糜蛋白酶原和糜蛋白酶有關。

艾美捷

Worthington

胰凝乳蛋白酶

特異性

：

胰蛋白酶透過裂解精氨酸和異亮氨酸（R15 和 I16）之間的鍵來啟用胰凝乳蛋白酶，從而導致結構修飾和底物結合位點的形成（Sears 2010）。胰凝乳蛋白酶與胰蛋白酶的不同之處在於胰蛋白酶在精氨酸和賴氨酸殘基處切割肽，而胰凝乳蛋白酶更喜歡大的疏水殘基（Hedstrom等， 1992）。胰凝乳蛋白酶優先催化涉及酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸的 L-異構體的肽鍵的水解。它也很容易作用於敏感氨基酸的醯胺和酯。胰凝乳蛋白酶對大疏水殘基的特異性可以透過由殘基 189 到 195、214 到 220 和 225 到 228 形成的疏水 S1 結合來解釋（Cohen等人， 1981）。

儘管胰蛋白酶和糜蛋白酶的 S1 位點結構僅顯示出一個差異（在 189 位），但胰蛋白酶和糜蛋白酶的定點誘變未能互換特異性，這表明胰蛋白酶和糜蛋白酶實現底物特異性催化的機制尚不完全清楚。 Steitz等人1969 年和 Graf等人1988 年）。

艾美捷

Worthington

胰凝乳蛋白酶

分子特徵

：

糜蛋白酶 A 和 B 具有 80% 的序列同一性（Hartley 1964、Meloun等人1966、 Smillie 等人1968 和 Gráf等人2004）。催化三聯體（H57、D102 和 S195）的氨基酸在 S1 家族的肽酶序列中高度保守（Gráf et al。 2004）。214 位的絲氨酸在家族中也是高度保守的，並且已被提議作為催化三聯體的第四個成員（Ohara等人1989 和 McGrath等人1992）。

艾美捷

Worthington胰凝乳蛋白酶

的4個應用

：

1。序列分析

2。肽合成

3。肽圖

4。肽指紋圖譜

相關研究：

羧肽酶 B （COBC/COBPMS）

羧肽酶 Y （COY）梭菌蛋白酶， Endo-Arg-C （CP）

膠原酶 （CLS1-4/CLSPA）

彈性蛋白酶 （ES/ESL/ESFF）

透明質酸酶 （HSE/HSEP）

中性蛋白酶 （Dispase， NPRO ）

木瓜蛋白酶 （PAP/PAPL/PAP2）

胃蛋白酶 （PM）

蛋白酶、金黃色葡萄球菌、Endo-Glu-C （STAP）

蛋白酶 K （PROK）

胰蛋白酶 （TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK）

胰蛋白酶、SequENZ （TRSEQII/TRSEQZ ）

胰蛋白酶抑制劑 （LBI/OI/SI/SIC）