黃嘌呤氧化酶活性檢測試劑盒（尿酸比色法）

【Boxbio】黃嘌呤氧化酶活性檢測試劑盒（貨號：

AKAO006

）

黃嘌呤氧化酶（XOD）是生物體核心酸代謝過程中的關鍵氧化還原酶類，可以利用分子氧作為電子受體或亞甲基藍、苯醌、高鐵氰化物和硝酸鹽等人工電子受體催化氧化黃嘌呤、蝶呤和醛類等多種雜環化合物，並伴隨產生過氧化氫和超氧自由基等活性氧，具有重要的生理和病理功能，在高尿酸血癥的診斷、活性氧生理作用和氧化應激損傷等研究領域具有重要作用。

黃嘌呤氧化酶能夠催化黃嘌呤產生尿酸，產物在290 nm處具有特徵吸收峰，透過吸光值變化即可表徵黃嘌呤氧化酶的活性。

黃嘌呤氧化酶活性檢測原理

測定過程中所需要的儀器和試劑：紫外分光光度計、1 mL石英比色皿（光徑10 mm）、研缽/勻漿器、可調式移液器、臺式離心機、恆溫水浴/培養箱和蒸餾水。

1。粗酶液的製備（可根據預實驗結果適當調整樣本量及比例）

①組織：按照組織質量（g）：提取液體積（mL）為1：（5-10）的比例（建議稱取0。1 g組織，加入1 mL提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 8000 g離心10 min，取上清置於冰上待測。

②細菌或細胞：離心收集細菌或細胞至離心管內，按照細菌或細胞數量（10個）：提取液體積（mL）為（500-1000）：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1 mL提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功率20%或200 W，超聲3 s，間隔10 s，重複30次），4℃ 8000 g離心10 min，取上清置於冰上待測。

③血清（漿）、培養液等液體樣本：直接檢測或適當稀釋後再進行檢測。

2。測定步驟

①分光光度計預熱30 min以上，調節波長至290 nm，蒸餾水調零。

②根據使用量取出適量XOD工作液37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）預熱20 min以上。

吸光值測定：①立即混勻並開始計時，測定290 nm處初始吸光值，記為A1測定和A1空白；②測定60 s時290 nm處吸光值，記為A2測定和A2空白；③計算A測定=A2測定-A1測定，A空白=A2空白-A1空白，A=A測定-A空白。注：空白組只需測定1-2次。

注意事項

①若ΔA測定大於0。5或A1測定大於1。0時，建議將粗酶液適當稀釋後再進行測定，計算時相應修改；

②為保證結果準確且避免試劑損失，測定前請仔細閱讀說明書（以實際收到說明書內容為準），確認試劑儲存和準備是否充分，操作步驟是否清楚，且務必取2-3個預期差異較大的樣本進行預測定，過程中問題請您及時與工作人員聯絡。

For Research Use Only。 Not for Use in Diagnostic Procedures。