非洲豬瘟病毒，在飼料廠環境中的汙染分佈研究

隨著非洲豬瘟病毒（ASFV）在全球的傳播，飼料和原料作為病原體傳播的潛在載體，瞭解飼料製造業在這種高毒力病毒的潛在傳播方面的傳播途徑至關重要。

在美國堪薩斯州立大學生物安全研究所的生物安全3級抗原動物室建造了一箇中試規模的飼料粉碎機，包括混合器、鬥式提升機

相關噴嘴組成的中試規模的飼料廠

。在引入ASFV接種飼料之前和之後，對裝置上和室內的18個不同地點進行了

拭子檢查

，以評估環境汙染。首先，透過系統製造一批飼料，以確認飼料廠為ASFV陰性；然後將接種ASFV的飼料新增到混合器中，並使用其他未感染的原料進行生產。配料混合後透過鬥式提升機提升進入下個環節。隨後，又生產了四批不含ASFV的飼料。每批進料生產完成後收集環境拭子，位置分為四個區域：

A）進料接觸面，

B）非進料接觸面，但距離進料<3。2英尺，

C）非進料接觸面，距離進料>3。2英尺，

D）瞬間接觸，如工人鞋。

在BSL-3實驗室環境中，使用P72 ASFV基因的qPCR分析對環境拭子進行分析，以檢測ASFV特異性DNA。

在ASFV接種飼料之前收集的環境拭子對ASFV DNA呈陰性。在製造ASFV接種飼料後收集的環境拭子

導致A-D區的汙染

。ASFV-DNA的汙染水平報告為每毫升Ct值或基因組數（CN）。

在整個實驗過程中，沒有證據表明取樣區×批次相互作用，取樣地點或批次飼料之間的ASFV陽性反應比例也沒有差異。

這表明，一旦ASFV汙染物進入設施，汙染就會迅速變得廣泛並持續存在於環境表面上，即使在生產後續批次的ASFV未接種飼料期間也是如此。與所有其他表面相比，來自瞬間接觸表面（D區）的樣品具有更多可檢測的ASFV（較低的Ct值），表明ASFV汙染水平較高（高CN值）。與在生產ASFV接種的一批飼料後立即收集的樣品相比，在生產3批之後收集的樣品的ASFV可檢測性較低（Ct值較高），表明在隨後的飼料生產過程的重複中ASFV汙染水平較低（低CN值）。

有證據表明，基因組數/mL的取樣區×批次相互作用。對於在生產ASFV接種的一批飼料後收集的樣品，與飼料接觸表面（A區）相比，從飼料接觸表面（C區）>3。2英尺處的非進料接觸表面收集的拭子觀察到較少數量的ASFV基因組/mL（較高Ct），其他表面（B區和D區）沒有顯著差異的證據。在生產批次1、2、3之後，與其他取樣位置相比，從瞬態表面（區域D）收集的樣品檢測到更多的ASFV基因組複製/ mL（低Ct）。在生產批次4之後，沒有證據表明取樣位置之間檢測到的ASFV基因組複製/ mL的數量存在差異。

綜上所述，一旦ASFV被引入飼料生產環境，病毒就在整個工廠廣泛分佈，隨著後續批次飼料的生產，檢測頻率只有微小變化。

Elijah CG， Trujillo JD， Jones CK， Gaudreault NN， Stark CR， Cool KR， Paulk CB， Kwon T， Woodworth JC， Morozov I， Gebhardt JT， Richt JA。評估接種飼料生產後飼料廠環境中非洲豬瘟病毒的分佈情況。堪薩斯州農業實驗站研究報告

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