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澱粉含量檢測試劑盒(蒽酮比色法)

2022-06-22由 北京盒子生工BOXBIO 發表于 畜牧業

蒽酮試劑是什麼顏色

【Boxbio】澱粉含量檢測試劑盒(貨號:

AKSU015

澱粉是由葡萄糖分子聚合而成的

天然高分子化合物

,是細胞中碳水化合物的主要儲藏形式,在食品加工、微生物發酵、釀造、紡織和製藥等領域具有廣泛應用,其含量測定對生物體內糖代謝分析和食品營養價值評價具有重要意義。

使用洗脫液將樣品中可溶性糖與澱粉分開,澱粉經酸水解為葡萄糖,能夠與蒽酮反應生成藍綠色糠醛衍生物,產物在620 nm處具有特徵吸收峰,透過吸光值變化即可定量檢測澱粉的含量。

澱粉含量檢測試劑盒(蒽酮比色法)

澱粉試劑盒檢測原理

澱粉含量檢測試劑盒(蒽酮比色法)

澱粉含量檢測試劑盒(蒽酮比色法)

需自備試劑:濃硫酸(HSO,MW = 98。08,CAS: 7664-93-9)

澱粉含量檢測試劑盒(蒽酮比色法)

測定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、可調式移液器、臺式離心機、恆溫水浴、濃硫酸和蒸餾水。

1。澱粉的提取(可根據預實驗結果適當調整樣本量)

①稱取約0。1 g樣品於離心管中使用研磨杵充分研磨(或研缽中研碎),加入1 mL洗脫液,充分勻漿,80℃水浴提取30 min,3000 g常溫離心5 min,棄上清,留沉澱;

②沉澱中加入500 μL蒸餾水,95℃水浴糊化15 min(密封以防止水分散失);

③冷卻後,加入350 μL提取液,常溫提取15 min,振盪3-5次;

④加入850 μL蒸餾水混勻,3000 g常溫離心10 min,取上清液;

⑤取上清液100 μL加入700 μL蒸餾水(8倍稀釋)後即為待測樣本。

(注:若稀釋8倍後樣品吸光值大於1。0或小於0。1,建議將樣品再適當稀釋或濃縮後再進行測量)

2.測定步驟

①分光光度計預熱30 min以上,調節波長至620 nm,蒸餾水調零。

②在離心管中依次加入下列試劑:

澱粉含量檢測試劑盒(蒽酮比色法)

吸光值測定:反應結束後自然冷卻至室溫,測定620 nm處吸光度值,記為A測定,A標準,A空白;計算A測定=A測定-A空白,A標準=A標準-A空白。注:空白管只需測定1-2次。

標準曲線的建立:以0。1、0。05、0。04、0。03、0。02、0。01 mg/mL為橫座標(x),對應的ΔA標準為縱座標(y),繪製標準曲線,得到線性迴歸方程y=kx+b,將ΔA測定代入方程得到x(mg/mL)。

注意事項

①若測定吸光值超出標準線性檢測範圍,建議增加樣品稀釋倍數或增加樣本量後再進行測定,計算時相應調整;

②若樣本為澱粉含量較高的幹樣,可適當減小樣品量以保證充分提取,如稱取0。01 g-0。02 g幹樣,加入1 mL洗脫液再進行提取,且上清液可能需要稀釋50-100倍;

③濃硫酸具有強腐蝕性,請謹慎操作;

④為保證結果準確且避免試劑損失,測定前請仔細閱讀說明書(以實際收到說明書內容為準),確認試劑儲存和準備是否充分,操作步驟是否清楚,且務必取2-3個預期差異較大的樣本進行預測定,過程中問題請您及時與工作人員聯絡。

For Research Use Only。 Not for Use in Diagnostic Procedures。