威尼德分子雜交儀：核酸分子雜交中造成高背景的影響因數

核酸分子雜交中造成高背景的影響因數有以下幾種：

1

雜交溶液或洗滌溶液在使用前未預熱

2

探針濃度過高或探針未變性。將雜交液裝入雜交管時，體積減少，探針濃度發生了變化，應確保相應地調整探針濃度。

3

未從探針溶液中去除未結合核苷酸。

4

預雜交和雜交溶液中的預雜交或阻斷劑不足，充分的預雜交對於阻止膜的非特異性雜交非常重要。

5

雜交或洗脫條件不夠嚴格：

6

降低鹽濃度。

7

提高溫度。

8

增加

SDS

的濃度。

9

增加洗脫次數。

10

膜太乾燥，這通常可能是明顯重疊問題的原因，可能由以下原因引起：

11

探針體積太小。溶液更換速度太慢，尤其是批次更換處理時分子雜交儀放置不平整

可變軸角度過大。

12

膜上殘留的瓊脂糖可能導致背景模糊。在轉化膜後和固定交聯前（尤其是真空吸乾後），應在

2 x SSC

中沖洗膜，以去除殘留的瓊脂糖和多餘的鹽。

13

多個過濾器在瓶子中沒有用篩網隔開。

14

放射自顯影問題。放射自顯影圖上的隨機黑點和

“

閃電

”

標記可能是由靜電引起的。

威尼德

研發生產的

經濟型分子雜交儀

VH-1000

、

多功能型分子雜交儀

VH-4000

、

組合型分子雜交儀

VH-2000

，

底部

標配培養皿圓周運動托盤，選配

250ML/500ML

錐形瓶托盤，

96

孔酶標板托盤

，可適用於如放置雜交袋等其他嚴格要求的孵育實驗，

，以及膜洗脫和凝膠脫色，同時可以做恆溫微生物培養。

分子雜交儀是現代實驗室採用雜交技術的理想裝置，可替代塑膠雜交袋和水浴搖床，並避免破損帶來的汙染危害。