分子生物學級chelex100

Chelex 100螯合離子交換樹脂對銅、鐵和其他重金屬離子的選擇性高於鈉和鉀等一價陽離子。它對二價離子相對於一價離子的選擇性約為 5，000：1，即使在高濃度鹽溶液中，它也對過渡金屬具有很強的吸引力。

Chelex 100提取DNA的實驗步驟：

1。 將細胞材料加入1ml TE（1mM EDTA，10mM Tris：pH 8。0）中，並在室溫下孵育10-15分鐘。

2。 將管高速離心以沉澱細胞材料併除去上清液。

3。 將細胞物質沉澱重懸在5％Chelex 100中，將試管在56°C下孵育15-30分鐘，然後放在沸水浴中放置8分鐘。將試管高速離心2-3分鐘以沉澱沉澱的蛋白質。

4。 上清液含有DNA，可直接用於PCR含成對的亞氨基二乙酸根離子的共聚物。該樹脂對多價金屬離子（例如鎂（Mg2 +））具有很高的親和力；它螯合了多價金屬離子，並有效地將其從溶液中去除。

5。 Chelex 100提取DNA過程非常簡單，使用小珠形式提供的Chelex‘®100樹脂使用蒸餾水製成5％的懸浮液。將細胞材料與100懸浮液在56°C孵育30分鐘。此時，通常會新增消化大多數細胞蛋白質的蛋白酶K。在100°C下溫育8-10分鐘，以確保所有細胞都破裂並且蛋白質變性。然後將試管簡單地離心以將Chelex 100樹脂和變性的蛋白質沉澱在試管的底部，剩下含有要用於PCR的DNA的水溶液（圖1）。 Chelex 100懸浮液是鹼性的，pH值介於9。0和11。0之間，因此使用此程式分離的DNA是單鏈的。

chelex 100方法提取DNA的主要優點是：

※快速，耗時約1小時；

※使用很簡單，不涉及液體在試管之間的移動，從而減少了意外混合樣品的可能性；

※使用的成本比較低；並且可以避免使用有害化學物質；

※重要的是，它適用於各種法醫樣品和分子生物學其他應用。