革蘭氏陰性菌與革蘭氏陽性菌的區別 ​

假單胞菌是革蘭氏陽性嗎

革蘭氏陽性細菌與革蘭氏陰性細菌的結構差異

下圖說明了革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的結構差異。導致革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的視覺化特性不同的兩個關鍵特徵是肽聚糖層的厚度以及是否存在外部脂質膜。這是因為壁結構會影響細胞保留革蘭氏染色中使用的結晶紫染色的能力，然後可以在光學顯微鏡下對其進行觀察。

革蘭氏陽性菌具有厚的肽聚糖層，沒有外部脂質膜，而革蘭氏陰性菌具有較薄的肽聚糖層，並且具有外部脂質膜。

由於革蘭氏陽性菌缺少外部脂質膜，因此正確地指示其結構而不是染色特性時，它們被稱為單體。革蘭氏陰性菌擁有的外脂質膜意味著，當其物理結構時，它們被稱為二異味。

革蘭氏染色技術由丹麥細菌學家Hans Christian Gram在1884年開發。儘管革蘭氏染色不會告訴您正在尋找的特定物種，但是它可以是一種快速縮小潛在候選範圍並在必要時直

接進行後續測試的快速方法。

革蘭氏陽性染色與革蘭氏陰性染色

革蘭氏染色步驟

準備樣品:

1。在乾淨的玻璃顯微鏡載玻片上貼上樣品標識。確保使用鉛筆，因為染色過程中使用的試劑可能會洗掉墨水。

2。如果是從液態細菌培養物中製備載玻片，請執行以下操作：

使用無菌環將一滴小滴培養物輕拍到載玻片上。將小滴以圓周運動的方式輕輕塗抹到直徑約1釐米的區域中。對於非常密集的培養物，可能需要預先稀釋培養物，以確保染色後在顯微鏡下可以看到單個細菌細胞。

如果源材料來自細菌板：

將菌落材料環重懸在無菌磷酸鹽緩衝鹽水（PBS）中，然後進行液體培養。

3

。

塗抹物風乾後，將塗抹過的載玻片透過火焰兩次或三次。這會殺死 塗片中的微生物並將樣品固定在載玻片上，但請注意不要使樣品過熱， 因為這會改變細胞形態。

樣品染色:

1。輕輕地用紫羅蘭色

的紫色塗抹，然後靜置1分鐘。稍微傾斜片子，然後用自來水或蒸餾水輕輕沖洗 。

結晶紫是一種水溶性染料，可進入細菌細胞壁中的肽聚糖層。

2。用克氏碘輕輕塗抹塗片，然後靜置1分鐘。稍微傾斜幻燈片，然後用自來水或蒸餾水輕輕沖洗。現在，塗片將顯示為紫色。加入革蘭氏碘溶液（碘和碘化鉀）與紫羅蘭形成複合物，紫羅蘭色晶體變得更大，而且不溶於水。

3。使用95%乙醇或丙酮使塗片脫色。稍微傾斜滑片，然後逐滴滴加酒精，直到酒精幾乎完全清除（5-10秒），立即用水沖洗以避免過度脫色。脫色劑使肽聚糖層脫水，使其收縮並變緊。在革蘭氏陽性細菌中，大的結晶紫碘複合物無法穿透並逃脫厚的肽聚糖層，從而形成紫色染色的細胞。然而，在革蘭氏陰性細菌中，外膜降解，肽聚糖薄層不能保留結晶的紫-碘配合物，並且顏色丟失。

4。用番紅花復染劑輕輕沖洗，並放置45秒鐘。稍微傾斜幻燈片，然後用自來水或蒸餾水輕輕沖洗。 番紅花微溶於水，會使細菌細胞染成淡紅色，從而使革蘭氏陰性細胞視覺化，而不會影響對革蘭氏陽性細胞紫色的觀察。

5。將載玻片吸乾，放在濾紙上，然後在油浸下使用光學顯微鏡觀察塗片。

革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌的區別

革蘭氏陽性菌

當革蘭氏染色後在光學顯微鏡下觀察時，革蘭氏陽性細菌具有獨特的紫色外觀。這是由於紫色結晶紫染色保留在細胞壁的厚肽聚糖層中。革蘭氏陽性細菌的例子包括所有葡萄球菌，所有鏈球菌和某些李斯特菌。

革蘭氏陰性菌

當在革蘭氏染色後在光學顯微鏡下觀察時，革蘭氏陰性細菌呈現淡紅色。這是因為它們的細胞壁的結構不能保留結晶紫染色，因此僅透過番紅花復染染色。革蘭氏陰性細菌的例子包括腸球菌，沙門氏菌和假單胞菌。

革蘭氏染色不能可靠地用於評估細菌的系統發育關係。革蘭氏陽性菌的單膜被認為是

祖先狀態

。從歷史上看，革蘭氏陰性細菌上發現的第二個膜僅進化一次，因此所有革蘭氏陰性物種之間的相互關係比與革蘭氏陽性物種之間的關係更緊密。但是，遺傳分析表明情況並非如此，它可能在不同的譜系中

進化了多次，

是趨同進化的產物。

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