黴菌斜面轉接培養

操作步驟：

一、開箱檢查：

開啟包裝箱，檢視斜面是否破損，菌株編號與說明書是否一致。

二、實驗準備：

仔細閱讀菌株說明書，準備2個新鮮平板或斜面。

三、器材滅菌：

斜面試管表面消毒後，轉移至生物安全櫃中，管口灼燒滅菌冷卻備用。接種鋤和接種鏟在酒精燈外焰翻轉灼燒滅菌3-5分鐘，冷卻備用，冷卻後用接種鋤在斜面上相距0。5cm處切兩條平行線（與試管垂直）。

四、切分斜面：

換接種鏟在兩條平行線之間相距0。5cm處切兩條平行線（與試管平行），形成0。5cm*0。5cm的小正方形菌塊。

五、黴菌轉接：

用接種鏟挑取菌塊平放到平板或斜面（固體瓊脂表面）上（菌塊正面朝上）。轉接多個平板或斜面，重複以上操作即可。

六、完成培養：

平板正放，斜面傾斜放置於黴菌培養箱中培養。（參照菌種說明書上的培養條件設定溫度）

（1）實驗材料

根黴，毛黴，黑麴黴，青黴，土豆瓊脂培養基，培養皿，載玻片，蓋玻片，鑷子，顯微鏡，小刀，U形管等。

（2）實驗步驟

1、配置培養基：根據原料用量配置土豆培養基。配置時，先急火煮沸，在溫火加熱20min，若有渾濁出現，則需過濾，然後定容。包紮土豆培養基，甘油等其他用品。滅菌後取出備用2、培養小室準備及滅菌在培養皿底部鋪一張略小於皿底的圓形濾紙片，濾紙片上依次放上“U”形載玻片擱架、載玻片、蓋玻片-四片，蓋上皿蓋，牛皮紙包紮，於恆溫乾燥箱中121℃滅菌30min烘乾備用；

2、瓊脂薄片製作：

a）將稍微冷卻的培養基，倒在培養皿 中，做成薄平板。培養基應該要倒 得薄而均勻。注意無菌操作。

b）用解剖刀將瓊脂薄平板切成邊長不大於1cm的瓊脂薄片

c）用解剖刀將瓊脂薄片移至小室載玻片上（一個載玻片上方兩塊薄片）

3、取菌接種：用接種環挑取少量待觀察的黴菌孢子（黴菌菌種的表面輕輕刮取即可），接種於固體培養基邊緣，以便於黴菌生長。接種時只要將帶菌的接種環在載玻片上輕輕碰幾下即可。接種量要少，以免培養後菌絲過於稠密而影響觀察。

4、加蓋玻片：用無菌鑷子將皿內的蓋玻片蓋在瓊脂薄層上，用鑷子輕壓蓋玻片，使蓋玻片和載玻片之間的距離相當接近，但不能壓扁。蓋玻片不能緊貼載玻片，要彼此留有小縫隙，一是為了通氣，二是使各部分結構平行排列，易於觀察。

5、倒保溼劑：每皿倒入約2-3mL20%的經滅菌處理的甘油，使皿內濾紙完全溼潤，以保持皿內溼度，蓋上皿蓋。製成載玻片溼室。

6、正置培養：將平皿置於27℃黴菌培養箱中培養一週。

7、觀察：將培養好的載玻片取出，置於顯微鏡下直接觀察。

（3）實驗結果及分析

實驗結果

1。根黴：菌絲無隔，有假根、匍匐菌絲。假根著生處有向上直立的孢囊梗，其頂端膨大成孢子囊，底部為半球形囊軸。

2。毛黴：孢囊梗直接由菌絲出，頂端為球形孢子囊

3。黑麴黴：菌絲有隔，氣生菌絲分化為分生孢子梗（無隔），頂端 膨脹為球狀頂囊。

4。青黴：菌絲有隔，分生孢子梗頂端不膨大，無頂囊，多次分枝成幾輪小梗，小梗頂端長孢子。分生孢子梗呈掃帚狀。

如何讓黴菌產孢子？

一般微生物都會在逆境下產孢子，比如低溫、紫外照射等惡劣的生存條件，有的情況下，陽光照射也能促使產孢。不同的菌的產孢條件還不太一樣，要因菌而異，和培養基也有關。可以找找相關資料查查產孢培養基，可以試試水瓊脂培養基（直接在水中加瓊脂、無其他營養物質）。