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血清熱滅活,那些你不知道的細節(下)

2023-01-23由 締一0601 發表于 農業

血清屬於細胞內液嗎

血清是否均需要熱滅活?

血清的最佳工作溫度一般是在37℃左右,所以熱滅火對於血清而言,也是一種不小的傷害,會導致一些營養成分流失,進而影響細胞狀態。

但如果所用血清中含有補體,且所培養的細胞、所涉及的實驗對補體相關的蛋白較為敏感,建議進行熱滅活處理。

胎牛血清

正規的胎牛血清,要求對5-8月胎齡(一般牛在10個月左右足月,後自然分娩)的胎牛採用心臟穿刺的方法採血,隨後進行其他製備步驟,得到胎牛血清。

因此:

靠譜的胎牛血清,沒有形成一個完整的補體系統,不會真正地干預免疫!

非胎牛血清

新生牛血清、小牛血清、成牛血清、馬血清、豬血清這類動物血清,一般採集自補體系統發育完全的供體,因此,如果涉及以下幾個方向(包括但不限於)建議合理熱滅活。

1、免疫學研究

2、誘導胚胎幹細胞分化

3、利用昆蟲細胞研究病毒感染

4、培養平滑肌細胞

5、其他補體參與的細胞培養過程

血清熱滅活,那些你不知道的細節(下)

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如何合理熱滅活

必須要滅活,根據血清廠家多年來總結的經驗,常規解凍後,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠最大程度地保留營養成分。

另外,還有三個細節需要注意:

1、將血清用三步法徹底解凍後再進行熱滅活。

血清熱滅活,那些你不知道的細節(下)

2、為儘可能減輕熱滅活對血清品質的影響,一次滅活的血清體積不宜過大。

3、溫度需有對照

最好準備同樣的容器裝相等體積的水(初始溫度與血清相同溫度),滅活時將裝有血清和水的容器同時放入40℃水浴,在裝水的容器中放置溫度計,加熱過程中不時地輕輕旋轉混勻血清,當溫度計顯示達到40℃左右,開始計時。

血清熱滅活,那些你不知道的細節(下)

血清熱滅活,那些你不知道的細節(下)

注意事項:

水面沒過血清液麵且管底不接觸水浴鍋底面。

溫度計需時不時晃動,且不接觸管壁。

初始溫度應相同。

兩容器材質相同。

液體體積相同。

裝水容器口用封口膜或保鮮膜封住,只露出溫度計即可。