野生稻遺傳轉化轉不出來怎麼辦?
2023-01-09由 武漢伯遠生物 發表于 農業
水稻是用農桿菌轉化法嗎
野生稻作為亞洲栽培稻的近緣祖先種,是稻種資源的重要組成部分、水稻雜交育種工作中最為重要的材料,具有許多珍貴的優良性狀,是保證糧食安全的重要因素,具有較高的研究、開發與利用價值。在轉基因水稻大面積種植之後,轉基因向野生稻轉移將是不可避免的大機率事件,對攜帶外源轉基因野生稻的安全性進行評估,對於保障野生稻資源和生態安全都具有重要意義。為了更好的利用野生稻資源,利用植物遺傳轉化來研究基因和基因組功能已成為必不可少的技術環節。使用我司已被授權的專利——LY培養基,以成熟胚作為受體材料,用攜帶目標基因載體的農桿菌侵染受體材料,將T-DNA插入到基因組中,經過對應抗性的抗生素篩選,獲得獨立的抗性愈傷組織,進一步分化並再生為遺傳轉化株系。
背景說明
野生稻作為亞洲栽培稻的近緣祖先種,是稻種資源的重要組成部分、水稻雜交育種工作中最為重要的材料,具有許多珍貴的優良性狀,是保證糧食安全的重要因素,具有較高的研究、開發與利用價值。在轉基因水稻大面積種植之後,轉基因向野生稻轉移將是不可避免的大機率事件,對攜帶外源轉基因野生稻的安全性進行評估,對於保障野生稻資源和生態安全都具有重要意義。為了更好的利用野生稻資源,利用植物遺傳轉化來研究基因和基因組功能已成為必不可少的技術環節。
服務內容及說明
使用我司已被授權的專利——LY培養基(專利號:ZL200910273352。3),以成熟胚作為受體材料,用攜帶目標基因載體的農桿菌侵染受體材料,將T-DNA插入到基因組中,經過對應抗性的抗生素篩選,獲得獨立的抗性愈傷組織,進一步分化並再生為遺傳轉化株系。
技術優勢
1、我司擁有多年從事植物遺傳轉化的專業技術團隊,可保障實驗成功率。
2、高效的實驗流程。最佳化的成熟胚轉化體系,可隨時開展遺傳轉化專案;採用農桿菌轉化法,快速、高效、穩定、單複製插入為主,支援潮黴素、G418、Basta、草甘膦、甘露糖等多種真核抗性篩選。
3、完善的服務支援。前期提供專業的技術諮詢和指導,最佳化專案;實驗中隨時溝通交流,及時瞭解進展;專案完成後根據合同提供約定的結果。
4、我司提供野生稻繁種服務,特別適合無暇管理繁種工作或遇特殊季節無法進行繁種的客戶。
備註
1、客戶可直接提供構建好的野生稻轉化載體,也可委託本公司進行相關載體構建服務。
客戶提供質粒要求:
濃度:80-100ng/μL;
體積:≥10μL;
質粒無降解。
注:質粒出現降解會影響後續實驗,運輸過程中可加冰袋或乾冰避免此類問題。
客戶提供大腸桿菌要求:
大腸桿菌菌液或菌板均可。菌液:1年以內的菌液,加甘油儲存;菌板:一週內活化的菌板。
客戶提供農桿菌要求:
農桿菌菌液或菌板均可。菌液:1年以內的菌液,加甘油儲存;菌板:一週內活化的菌板。
注:推薦客戶提供質粒,大腸桿菌和農桿菌在郵寄過程中很容易發生汙染。
2、需提供一年以內成熟種子≥30g。
3、如客戶指定受體材料為突變體或其他特殊品種,需增加實驗時間,並另行協商具體服務事項。
4、我司提供獨立的轉基因株系,以抗性基因PCR鑑定陽性結果作為結題標準;對於基因編輯苗我司提供陽性轉基因株系的具體突變資訊。
可轉品種
普通野生稻
O。 mfipogon Griff。
、非洲栽培稻
O。 glaberrima
、東鄉野生稻
O。 rufipogon Griff。
、非洲長雄蕊野生稻
O。 longistaminata
客戶下單及專案資訊填寫
在我司官網http://plant。biorun。com/進行註冊或登入,請客戶按照頁面提示填寫農桿菌菌株名稱、載體抗性、受體材料所屬物種(野生稻)等資訊,價格由系統自動計算。
實驗資訊
在實驗開始、結題關鍵節點系統會自動傳送簡訊到申請人手機進行告知,實驗過程中客戶可以隨時登入客戶管理系統査看專案實時進展情況。實驗結題後,實驗報告、檢測結果可線上査看,並永久保留。實驗過程用到的菌株、載體、受體材料免費為客戶儲存半年後銷燬。
實驗結題標準
陽性對照有正確的條帶且陰性對照無條帶。
實驗交付結果
1、每個標準轉化按照以下表格提供PCR陽性鑑定株系(真核抗性基因),也可以根據客戶要求提供任意數量的獨立轉化株系,多岀部分根據實際情況進行收費;
①膠圖:白底膠圖,條帶單一,無雜帶。陽性菌亮,陰性苗與陰性水不亮,陽性苗與陽性菌條帶一致,檢測苗子棵數正確。
②檢測表格完整:包含檢測編號,陽性苗編號,陽性總數,陽性率。
③檢測引物、載體序列等資訊完整。
2、實驗資料及圖片;
3、該專案的實驗報告。
案例展示
圖 野生稻遺傳轉化
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