植物硝態氮含量檢測試劑盒(硝基水楊酸法)
2022-12-30由 北京盒子生工BOXBIO 發表于 農業
測定硝態氮有何生理意義
【Boxbio】植物硝態氮含量檢測試劑盒(貨號:
AKPL013
)
氮在植物的生長和發育過程中起著極其重要的作用,硝酸鹽是植物吸收的主要含氮物質之一,不僅是植物從土壤中吸收的重要無機氮素形式,也是植物體內轉移的主要氮素形式,作為高等植物重要的氮素營養,直接影響植物的生長,測定植物體內硝態氮含量變化對了解氮代謝機制具有重要的意義。
NO在濃酸條件下能夠與水楊酸反應生成硝基水楊酸,產物在鹼性條件下呈黃色,在410 nm處具有特徵吸收峰,透過吸光值變化即可定量檢測硝態氮的含量。
植物硝態氮含量檢測原理
標準稀釋液的製備:將1000 μg/mL NO3-N標準液使用蒸餾水稀釋至60、40、20、10、5、2。5 μg/mL即為標準稀釋液。
需自備試劑:
濃硫酸(HSO,MW = 98。078,CAS: 7664-93-9)
測定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、可調式移液器、臺式離心機、恆溫水浴、濃硫酸和蒸餾水。
1。植物樣品的處理(可根據預實驗結果適當調整樣本量及比例)
按照組織質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:(5-10)的比例(建議稱取0。1 g組織,加入1 mL蒸餾水)處理樣品,室溫勻漿後置於90℃恆溫水浴中浸提30 min(密封以防止水分散失,期間不斷顛倒混勻),冷至室溫後,12000 g常溫離心15 min,取上清即為待測樣本。
注:含色素樣本需在室溫勻漿後加入約3 mg試劑三後再進行後續提取。
吸光值測定:取1 mL反應液置於1 mL玻璃比色皿中,測定410 nm處吸光值,記為A測定、A對照、A標準和A空白;計算ΔA測定=A測定-A對照,ΔA標準=A標準-A空白。注:空白管只需測定1-2次,每個測定管均需設一個對照管。
標準曲線的建立:以60、40、20、10、5、2。5 μg/mL為橫座標(x),以其對應的A標準為縱座標(y),繪製標準曲線,得到標準方程y=kx+b,將A測定帶入公式中得到x(μg/mL)。
注意事項
①試劑一和試劑二具有強腐蝕性,操作時注意做好防護措施;
②試劑一配置後保質期較短,為便於安排實驗時間,附帶一瓶試劑一作為備用(每瓶均可完成至少25個樣本的測定),可根據實際情況現用現配;
③若A測定超出標準吸光值線性範圍:高於最高值建議將待測樣本使用蒸餾水適當稀釋後再進行測定;低於最低值建議適當增加樣本量重新提取後再進行測定,計算時相應修改;
④為保證結果準確且避免試劑損失,測定前請仔細閱讀說明書(以實際收到說明書內容為準),確認試劑儲存和準備是否充分,操作步驟是否清楚,且務必取2-3個預期差異較大的樣本進行預測定,過程中問題請您及時與工作人員聯絡。
For Research Use Only。 Not for Use in Diagnostic Procedures。