硝態氮檢測試劑盒(磺胺比色法)
2022-12-02由 尚寶生物 發表于 農業
測定硝態氮有何生理意義
硝態氮檢測試劑盒(磺胺比色法)
產品貨號:
BA1732
產品規格:
50T
產品簡介:
硝態氮是植物最主要的氮源,植物體內硝態氮含量反映了土壤中硝態氮的供應情況,可作為土壤氮肥的指標。測定植物體內的硝態氮含量,不僅能夠反映出植物的氮素營養情況,而且對鑑定蔬菜和以植物為原料的加工製品的品質也有重要的意義。
硝態氮檢測試劑盒(磺胺比色法)檢測原理是硝酸根還原成亞硝酸根後,與對氨基磺酸和萘胺結合,形成玫瑰紅色的偶氮化合物,其顏色深淺與氮含量在一定範圍內呈正比,以分光光度計測定520nm處吸光度,根據
NO
3
-
反應的標準曲線將A
520
換算成NO
3
-
濃度,再依據上述關係式即可計算出硝態氮含量,該試劑盒主要用於測定植物組織、血液、組織樣本等中的硝態氮含量。該試劑盒僅用於科研領域,不宜用於臨床診斷或其他用途
。
產品組成:
需自備的儀器和用品:
蒸餾水、植物組織(大豆、玉米等葉柄)、血液、尿液等、離心管或試管、離心機、比色杯、分光光度計。
操作步驟(僅供參考):
1。
準備樣品:
①植物樣品:取正常或逆境下的新鮮植物組織0。25g,清洗乾淨,擦乾,剪碎成1~2的碎片,加入10ml硝態氮裂解液,劇烈振盪2~4min,靜置澄清後,上清液即為硝態氮提取液,4℃儲存備用。
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備後可以直接用於本試劑盒的測定,4℃儲存,用於硝態氮的檢測。
③高活性樣品:如果樣品中含有較高濃度的硝態氮,可以使用硝態氮裂解液或蒸餾水進行恰當的稀釋。
2。
配製系
NO
3
-
標準溶液:取
NO
3
-
標準(100μg/ml)按下表繼續稀釋:
3。
NO
3
-
加樣:按照下表設定空白管、標準管、測定管,溶液應按照順序依次加入,並注意避免產生氣泡。如果樣品中的硝態氮濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋後再進行測定,樣品的檢測最好能設定平行管。
4。
NO
3
-
測定:劇烈振盪1min,靜置10min,將離心管或試管中液體過量的傾入新的離心管或試管中,使部分流出管外以便去除白色粉;4000g離心5min,取上清液,以空白調零,分光光度計(1cm光徑比色杯)測定標準管、測定管520nm處吸光度(記為A
標準
、A
測定
)。
計算:
以系列
NO
3
-
標準(1-5號管)濃度(μg/ml)為橫座標,以對應的吸光度為縱座標,製作標準曲線,根據測定管的吸光度進而計算
NO
3
-
含量。根據如下公式計算具體樣品中硝態氮的含量:
植物組織樣品硝態氮(μg/g)=C×V
式中:C=從標準曲線上查得的
NO
3
-
濃度(μg/ml)
V=1g組織所製備的提取液的總體積(ml),本法中為40ml。
血清、尿液等樣品硝態氮(μg/ml)=C×N×V
T
/V
S
式中:C=從標準曲線上查得的
NO
3
-
濃度(μg/ml)
V
T
=提取液的總體積(ml)。
N=稀釋倍數
V
S
=測定時加入提取液體積(ml)
注意事項:
1。
實驗材料應儘量新鮮,如取材後不立即使用,應存於4℃。
2。
NO
3
-
Assay buffer易揮發,請密閉儲存。
3。
如果沒有分光光度計,也可以使用普通的酶標儀測定,但應考慮酶標儀的最大檢測體積。
4。
所測樣品的濃度過高時,應用硝態氮裂解液或蒸餾水稀釋樣品後重新測定。
有效期:
12個月有效。
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