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Southern雜交是1975年Southern建立起來的一種雜交方法

2022-08-01由 情感點撥坊 發表于 農業

印跡雜交是什麼呢

不僅工作量大,又耗費財力,用菌落雜交(colony hybridization) (圖 3-24),就方便得多首先要將轉化的受體菌在合適的瓊脂平板上製成單菌落,然後將菌落複製到硝酸纖維素濾膜上,保留主平板,將硝酸纖維素濾膜_上的菌落進行原位溶菌、原位釋放DNA、原位進行DNA變性、中和洗滌後進行原位固定。

然後同特異的探針進行雜交,透過放射自顯影后,有雜交訊號的即為重組體,對照主平板則可將重組體選擇出來。

Southern雜交是1975年Southern建立起來的一種雜交方法

圖3-24菌落雜交的基本過程(引自0ld & Primrose, 1980)

2。 Southern 雜交Southern雜交(Southern hybridization)是1975年Southern建立起來的一種雜交方法,屬固相- -液相雜交。該法的主要特點是利用可毛細現象將DNA轉移到固體支援物上,稱為Southern轉移或Southern印跡(Southernblotting)。它首先用合適的限制性內切酶將DNA切割後。

Southern雜交是1975年Southern建立起來的一種雜交方法

進行電泳分離後,利用乾燥的吸水紙產生毛細作用,使液體經過凝膠,從而使DNA片段由液流攜帶而從凝膠轉移並結合在固體支援物表面,然後進行雜交(圖3-25)。

圖3-25 Southern雜交中的DNA轉移(引自Alberts et al。 2002)3。 Northern 雜交Northern雜交(Northern Hybridization)是分析RNA的一種方法,它的基本原理是將RNA樣品透過變性瓊脂糖凝膠