技術｜全面的抗體儲存指南

NOTE：

請務必檢視關於您抗體的具體資料，獲取儲存建議。我們不對儲存不當的抗體負任何責任。如果儲存和處理得當，大部分抗體的活性都可保留數月，甚至若干年。

如果您有疑問可以搜尋（北京艾柏森）進行線上免費諮詢。

儲存溫度

對於許多抗體而言，分裝為小份在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下凍存是最佳的儲存條件。分裝抗體可以最大限度減少凍融對抗體造成的損壞，還可避免多次從同一管中移取抗體而引入汙染。分裝後抗體只可凍融一次，如有剩餘，應儲存在 4 ℃ 下。

當您收到定製的抗體後，請以 10，000 × g 離心 20 秒，沉降滯留在管蓋螺紋中的溶液，然後分裝抗體並將其轉移至低蛋白質結合的微量離心管中。分裝抗體的量取決於您在實驗中常用的量。分裝抗體時，每管應不少於 10 μL；分裝抗體量越少，濃度就越容易受到蒸發以及儲存樣品管表面吸附的影響。

在大部分情況下，可在收到抗體之後立即將其保存於 4 ℃ 下，可儲存 1 至 2 周。遵循資料表上的儲存建議非常重要。

特例

切勿凍存酶偶聯抗體，而應將其儲存在 4 ℃ 下。凍融不僅會影響抗體的結合能力，還會降低酶活性。

偶聯抗體（無論是偶聯有熒光染料、酶還是生物素）應儲存在深色樣品瓶中或用錫箔紙包裹樣品瓶。暴露於光下會影響偶聯物的活性。熒光偶聯物尤其容易發生光致漂白，因此在實驗各階段都應避光儲存。

IgG3 同型抗體的獨特之處在於其解凍後容易形成聚集體，因此應始終儲存在 4 ℃ 下。

腹水液中可能含有蛋白酶，因此收到後應儘快凍存。

汙染

為了防止微生物汙染，可將疊氮化鈉加入抗體制備物中，疊氮化鈉的最終濃度為 0。02%（w/v）。一般運送至實驗室的抗體中都含有這種保護劑，其濃度範圍為 0。02%-0。05%。儲存緩衝液部分的詳細資料會對此項進行說明。

不使用疊氮化鈉的情況

如果要用抗體對活細胞進行染色或處理，或者要用抗體進行體內研究，請務必使用不含疊氮化鈉的製備物。這種抗菌劑對大部分生物體都有毒害作用：它會阻斷細胞色素電子傳遞系統。

疊氮化鈉會干擾涉及胺基的所有偶聯反應，因此必須在進行偶聯反應之前將其去除。完成偶聯反應之後，可使用疊氮化鈉儲存抗體。另一種可用的抗菌劑是 0。01% 硫柳汞鈉（硫柳汞），這種物質不含伯胺。

抗體溶液中的疊氮化鈉可透過滲析或凝膠過濾去除。IgG 的分子量為 150，000 Da（IgM 約為600，000 Da），疊氮化鈉的分子量為 65 Da。截留分子量為 14，000 Da 的微滲析裝置可使疊氮化物順利擴散出去，而抗體得以保留。

滲析過程在燒杯中（置於磁力攪拌器上，溫度保持 4 ℃）進行，每毫升抗體使用至少 1 升預冷的 PBS，攪拌滲析裝置 6小時。更換 PBS 兩次，每次更換後均攪拌至少 6 小時。如有可能，所有材料都應滅菌，並且應在無菌條件下處理所得製備物。

凍融損壞

反覆凍融可能使抗體變性，導致抗體形成聚集體，從而降低其結合能力。

對大部分抗體而言，在 -20 ℃ 下儲存就已足夠；在 -80 ℃ 下儲存並無明顯優勢。應避免使用無霜冰箱，因為此類冰箱的凍融迴圈（用於減少霜的形成）正是儲存此類抗體需要避免的。出於相同的原因，應將抗體樣品瓶放在冰箱中溫度波動最小的區域，例如抵靠冰箱背板放置而不是置於冰箱門架上。

有些研究人員向抗體中加入冷凍保護劑甘油（最終濃度為 50%）以防止凍融損壞；甘油可將冷凝點降至 -20 ℃ 以下。雖然這種方法可用於多種抗體，不建議在 -80 ℃ 下儲存含甘油的溶液，因為該溫度低於甘油的冷凝點。請注意，甘油可能會被細菌汙染。如果加入了甘油或任何冷凍保護劑，應當小心操作，確保獲得無菌製備物。

蛋白質濃度和穩定性

將抗體稀釋至工作濃度後，在 4 ℃ 下儲存不得超過一天。一般而言，以高濃度儲存的蛋白質更不易降解，理想濃度是 1 mg/mL 或更高。這就是將蛋白質（如 BSA）作為穩定劑加入抗體溶液的基本原理。加入的蛋白質還能儘可能減少抗體結合到容器壁上造成的損失。請勿向將要進行偶聯的抗體中加入蛋白質穩定劑，因為蛋白質穩定劑會與抗體競爭，降低偶聯效率。