高效液相色譜儀測定家禽可食性組織中乙氧醯胺苯甲酯殘留量

一、原理

試樣中殘留的乙氧醯胺苯甲酯用乙腈提取，正己烷脫脂，無水硫酸鈉脫水，濃縮，正己烷-丙酮溶解殘餘物，固相萃取柱淨化，甲醇洗脫，高效液相色譜儀測定，外標法定量。

二、試劑與材料

除另有規定外，所有試劑均為分析純，水為符合GB/T 6682規定的一級水。

2。1 試劑

2。1。1 乙腈（CH 3 CN）：色譜純。

2。1。2 甲醇（CH 3 OH）：色譜純。

2。1。3 正己烷（C 6 H 14 ）。

2。1。4 丙酮（CH 3 COCH 3 ）。

2。1。5 無水硫酸鈉（Na 2 SO 4 ）。

2。2 標準品

乙氧醯胺苯甲酯：含量≥98。5%。

2。3 標準溶液的製備

標準儲備液：取乙氧醯胺苯甲酯標準品約 10 mg，精密稱定，於 100mL 量瓶中，加甲醇適量使溶解並稀釋至刻度，搖勻。4℃儲存，有效期 1 周。

2。4 材料：矽酸鎂固相萃取柱：100mg/mL，或相當者。

三、儀器和裝置

3。1 高效液相色譜儀：配紫外檢測器。

3。2 分析天平：感量 0。000 01 g 和 0。01 g。

3。3 勻漿機。

3。4 離心機：4 000 r/min。

3。5 旋轉蒸發儀。

3。6 旋渦混合器：3 000 r/min。。

3。7 振盪器。

四、測定步驟

4。1 提取

稱取試樣5g（準確至±20mg），置50 mL具塞離心管中，加乙腈15 mL，無水硫酸鈉10 g，正己烷10 mL，渦旋混合1 min，振盪5 min，4000 r/min離心10 min。取下層乙腈於雞心瓶中備用。沉澱中再加入乙腈15 mL，重新提取一次，合併兩次乙腈提取液於同一雞心瓶中，45℃旋轉蒸發至近幹。加正己烷-丙酮（9：1）5。0 ml使溶解，超聲30 s，搖勻，轉移至10 mL離心管，4000 r/min離心10 min，上清液備用。

4。2 淨化

矽酸鎂固相萃取柱用甲醇5 mL預洗。取上述上清液1。0 mL過柱，用正己烷3 mL淋洗，擠幹。用甲醇1。0 mL洗脫，擠幹，收集洗脫液，過0。45 m有機濾膜，供高效液相色譜儀測定。

4。3 標準曲線的製備

分別精密量取標準儲備液適量，用甲醇稀釋成濃度分別為5。0、2。5、1。0、0。5、0。25、0。10、0。05μg/mL的標準溶液，供高效液相色譜儀測定。臨用前配製。

4。4 測定

4。4。1 液相色譜參考條件

a）色譜柱：C 18 柱（250 mm×4。6 mm，5μm），或相當者。

b）流動相：乙腈-水（30：70）。

c）流速：1。0 mL/min。

d）檢測波長：270 nm。

e）進樣量：10 μL。

4。4。2 測定法

取試樣溶液和相應濃度的標準溶液，作單點或多點校準，按外標法以峰面積計算。標準溶液和試樣溶液中乙氧醯胺苯甲酯的響應值均應在儀器檢測的線性範圍內。在上述高效液相色譜儀條件下，標準溶液色譜圖見附錄A。

五、結果計算和表述

試樣中乙氧醯胺苯甲酯的殘留量按（1）計算：

…………………………………（1）

式中：

X —試樣中乙氧醯胺苯甲酯的殘留量，單位為微克每千克（g/kg）；

C S —標準溶液中乙氧醯胺苯甲酯的濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；

A —試樣溶液中乙氧醯胺苯甲酯的峰面積；

A S —標準溶液中乙氧醯胺苯甲酯的峰面積；

V 1 —試樣提取液濃縮近幹後殘餘物溶解的總體積，單位為毫升（mL）；

V 2 —過矽酸鎂固相萃取柱所用備用液體積，單位為毫升（mL）；

V 3 —洗脫液體積，單位為毫升（mL）；

m —試樣的質量，單位為克（g）；

計算結果需扣除空白值，以重複性條件下兩次獨立測定結果的算術平均值表示，保留三位有效數字。