研究證實，生長因子修飾幹細胞移植治療腎病綜合徵的臨床潛力

腎病綜合徵是由於腎小球基底膜通透性增高，導致血漿大量 蛋白從尿中丟失而引起的一種臨床綜合徵。近年來，腎病綜合徵發病率呈現出快速上升趨勢。長期大量蛋白尿，使機體內蛋白大量丟失，血漿蛋白低下，血漿膠體滲透壓下降，進而發生水 腫及高脂血症等改變，嚴重者可引起肺血栓栓塞等併發症。

血管內皮生長因子（VEGF）有高度特異性。正常情況下，腎臟的VEGF主要在腎小球足細胞和遠端腎小管及集合管等處有一定表達，能促進血管內皮細胞分裂，使腎小球的濾過及通透功能得以維持。

羊膜間充質幹細胞有來源豐富、不受倫理學限制、低免疫原 性、多向分化能力等優勢。在特定環境中，羊膜間充質幹細胞能夠被誘導分化為心肌細胞及神經細胞等，在心肌梗死、 脊髓損傷等疾病治療過程中發揮了很好的作用，並且未觀察到明顯的排斥反應。研究發現，外源性間充質幹細胞能夠分化為腎小管上皮細胞而促進腎功能的恢復。

背景：

外源基因在間充質幹細胞中的表達有利於增強其移植效應及提高其分化率。

目的：

探討血管內皮生長因子基因修飾羊膜間充質幹細胞移植對腎病綜合徵大鼠腎功能及凝血功能的改善作用。

方法：

從72只雄性SD大鼠中隨機選出18只，作為正常組，未給予任何干預；餘下的 54 只大鼠隨機分為模型組、羊膜間充質幹細胞組、血管內皮生長因子修飾組，每組 18 只，均於尾靜脈注射阿黴素建立腎病綜合徵模型。造模後24h，經尾靜脈注射生理鹽水、羊膜間充質幹細胞懸液、血管內皮生長因子基因修飾羊膜間充質幹細胞懸液各10μL，1次/d，連續3d。移植後12周採用全自動生化分析儀檢測血脂水平、腎功能指標及凝血指標變化，採用三氯乙酸法測定24h尿蛋白含量，採用RT-PCR、Western blot檢測大鼠腎組織 HPA及VEGFmRNA和蛋白的表達。

主要觀察指標：

① 各組大鼠的血脂水平、腎功能指標及凝血指標變化；

② 羊膜間充質幹細胞的存活和分佈情況；

③ 大 鼠腎組織HPA及VEGF的mRNA表達；

④ 大鼠腎組織HPA及VEGF的蛋白表達。

結果與結論：

①模型組24h尿蛋白定量及

血清總膽固醇、三醯甘油、低密度脂蛋白、肌酐、尿素氮水平

與正常組比較均明顯升高（P< 0。05），

血清總蛋白、白蛋白、高密度脂蛋白水平

則明顯降低（P< 0。01）。羊膜間充質幹細胞組及血管內皮生長因子修飾組上述各指標均較模型組明顯改善（P < 0。05）。血管內皮生長因子修飾組各項指標優於羊膜間充質幹細胞組，差異有顯著性意義（P< 0。05）；

見表1

②模型組各凝血指標呈高凝趨勢，

與模型組比較，羊膜間充質幹細胞組、血管內皮生長因子修飾組高凝狀況均有改善，

血管內皮生長因子修飾組更為明顯；

見表2

③

各組腎組織HPA及VEGFmRNA的表達與模型組相比，

羊膜間充質幹細胞組、VEGF修飾組及正常組HPAmRNA表達量均顯著減少，且正常組

見圖4。

④

各組腎組織HPA及VEGF的蛋白表達，

模型組HPA的表達量較正常組、羊膜間充質幹細胞組、VEGF修飾組升高（P<0。05）；羊膜間充質幹細胞組及VEGF修飾組均較模型組降低，且VEGF修飾組降低更明顯（P<0。05）。

各組間VEGF蛋白表達量比較發現，VEGF修飾組較其他3組均顯著升高(P<0.05)，

與模型組相比，羊膜間充質幹細胞組和正常組蛋白表達量亦升高（P<0。05），

見圖5。

研究發現，

腎小球內HPA基因的活性或表達增加，將使腎小球基膜上HS的分解增加，腎小球基膜電荷屏障被破壞。與

模型組相比，羊膜間充質幹細胞組、 VEGF修飾組HPAmRNA表達量均顯著減少，

且正常組

上述結果表明

應用VEGF修飾的羊膜間充質幹細胞對腎病綜合徵大鼠進行干預能夠改善腎功能及血液的高凝狀態。

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