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標準菌株復甦的方法

2022-01-21由 光之國的小光 發表于 畜牧業

用什麼稀釋菌液

用牛肉浸液製備的新鮮培養基,可保持菌株原有的特性。

從保藏中心得到的菌株為零代,菌株啟開後應分二份,一份供儲存菌種用,一份供傳代用為工作種子批。工作種子批使用不超過5代。儲存的菌種通常接種於半固體培養基,生長後用石蠟密封,4儲存。工作種子批接種適宜的培養基,35℃培養24-48小時,用接種環刮入無菌生理鹽水中,製成菌懸液,將菌液稀釋,與標準比濁管相同濃度,再用生理鹽水做10倍系列稀釋。

關於醫用細菌菌種復甦方法的說明:

1。復甦菌種前應準備適於該菌種生長的固體、液體培養基和培養環境,所有操作均應在符合生物安全保護及無菌條件下進行。

2啟開菌種宜採用鋸開法(鋸開前用70%酒精棉消毒菌種管外壁)。用吸管將液體培養基03ml注入被啟開的菌種安瓶中並吹打,使安瓶中的凍幹菌種溶解成菌懸液。

3。將上述菌懸液全部吸出,分別接種到固體斜面和液體培養管中,一般放置在37培養箱培養18-24小時。對需要特殊培養條件的細菌,如需5%-10%CO2或厭氧條件等,應分別於C02培養箱或厭氧培養箱中培養。

4。次日觀察菌種的生長情況,如菌種未生長,應繼續培養至72小時。

5。復甦後的菌種在傳1~2代後使用。

通常乾粉培養基的檢定接種液體培養基最適宜菌量為10-100個菌/ml,固體為100-1000個菌/ml,在平皿上應有100-1000個菌落生長,即菌落形成單位-CFU(Colour Form Unit)。