MS培養基的配製步驟

以配置1L培養基為例：

1、各種母液（20倍）的吸取

（1）用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量：

大量元素母液量取50ml

微量元素吸取5ml

鐵鹽吸取5ml

有機物吸取5ml

生長調節劑。以上溶液用1L量筒定容。

注：生長調節劑按需新增。有些生長調節劑不溶於水，2，4-D、NAA、IAA、赤黴素和ZT在配製時刻先用少量95%酒精溶解，再加水定容；KT和6-BA，可先溶於1mol/L鹽酸中，再加水定容；葉酸需少量稀氨水溶解。

（2）瓊脂：5-7g

（3）蔗糖：30g

2、測定PH值

用酸度計或精密PH試紙測PH值，調pH用滴管吸取物質的量濃度為1mol/L的NaOH溶液（過酸）或1 mol/L的HCL溶液（過鹼），逐滴滴入，邊滴邊攪拌，一直調到pH為5。8-6。0。

注：經高壓蒸汽滅菌後，由於某些成分的分解（如蔗糖分解）或氧化，酸度會增加（PH值一般會降低0。2）

3、加熱溶解與分裝

將溶液、瓊脂、蔗糖全部混合加熱，待瓊脂全部溶於溶液中，趁熱進行分裝。

分裝的容器要事先清洗乾淨，並經過烘乾處理。以三角瓶為例，1L培養基分裝於25-30個三角瓶中，每個三角瓶約30ml左右（一般佔容量的1/4-1/3左右）。注意，培養基不要接觸到瓶壁。

4、封口與包裝

分裝好的三角瓶用封口膜和細棉繩包紮好，標明培養基代號即可進行滅菌。

MS培養基（Murashige and Skoog medium）是植物組織培養中最常見的培養基。很多植物的細胞、組織和器官在MS培養基上表現良好的生長和發育。1/2MS培養基，即MS培養基無機鹽濃度減半，也被廣泛採用。MS培養基最大的特點是無機鹽的濃度特別高，在常見的植物培養基中是最高的。除了用途最為廣泛的MS培養基以外，基本培養基還有B5、N6、改良MS、Miller、Nitsh等。

培養基的分類：

1、按照態相不同可分為固體培養基和液體培養基。在固體培養基中，由於外植體會產生有害物質而造成自我毒害，需要準時轉移；而液體培養基有良好的通氣條件，彌補了固體培養基的缺點。但限於經費等問題，基礎實驗中固體培養基的使用比較廣泛。

2、按照培養過程可分為初代培養基和繼代培養基。初代培養基顧名思義用於初代培養中，初代培養是將外植體從植物體分離下來以後進行的初次培養；而繼代培養基是初代培養後用於外植體轉移繼續培養的培養基。

3、按照作用不同可分為誘導培養基、增殖培養基和生根培養基。不同用途的培養基是透過新增的不同生長調節劑來實現的。

需要的營養：

1、無機營養：

（1）大量元素：C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg。

（2）微量元素：Fe、Cu、Mo、Zn、Na、Mn、Co、B、I。

2、有機營養：

（1）維生素類：維生素C、維生素B1、維生素B6、維生素H、葉酸、煙酸。

（2）肌醇

（3）氨基酸：甘氨酸、絲氨酸、穀氨酸

（4）有機新增物：椰乳、香蕉、馬鈴薯、酵母提取液、麥芽提取液。

3、植物生長調節物質：

（1）生長素：誘導愈傷組織的形成、胚狀體的產生以及試管苗的生根。常有：2，4-D、NAA、IBA、IAA。

（2）細胞分裂素：促進細胞分裂和分化，促進側芽生長，抑制頂端優勢。常有：KT、BA、ZT。

（3）赤黴素

注：生長素/細胞分裂素的比值大，有利於不定根的形成；反之則促進不定芽的形成。

4、瓊脂

5、能源和滲透壓：蔗糖

6、其他成分：活性炭，可吸附有害物質。